华南预防医学 ›› 2016, Vol. 42 ›› Issue (4): 386-389.doi: 10.13217/j.scjpm.2016.0386

• 实验研究 • 上一篇    下一篇

荧光定量 PCR方法快速检测人肠道病毒埃可30的研究

易丽娜1,郑焕英2,肖红2,曾汉日2,陆靖1   

  1. 肇庆医学高等专科学校,广东 肇庆 526020
  • 收稿日期:2016-04-27 出版日期:2016-08-20 发布日期:2016-10-24
  • 作者简介:易丽娜 (1983—) ,女,博士研究生,助理研究员,研究方向:病原微生物检验

Real-time PCR assay for detection of human echovirus 30

YI Li-na, ZHENG Huan-ying, XIAO Hong, et al   

  • Received:2016-04-27 Online:2016-08-20 Published:2016-10-24
  • Contact: 广东省科技计划项目(2014A020212243)

摘要: 目的建立特异、快速、灵敏的人肠道病毒埃可30(ECHO30)核酸检测的荧光定量 PCR方法。方法应用 ClustalW软件分析ECHO30基因序列,设计特异性引物和 TaqMan探针 , 研制ECHO30病毒实时荧光定量PCR方法。与巢式 PCR方法比较,确定方法的灵敏性,并利用数字PCR定量该方法的检测下限。同时通过对广东省内主要流行的其他肠道病毒株的检验,确定方法的特异性。结果本研究建立的方法能特异性扩增ECHO30核酸,与巢式 PCR方法比较,灵敏度高,检测下限低至27.7 copies/μL;且与广东省内主要流行的其他肠道病毒株(肠道病毒71型和柯萨奇病毒A6、A10、A16)均无交叉反应。该方法无论对高浓度还是低浓度样本偏差均很小,具有很好的重复性。结论本研究建立的荧光定量 PCR是一种能快速、灵敏、特异检测ECHO30的方法,适用于临床早期诊断。

中图分类号: 

  • R446.5