华南预防医学 ›› 2021, Vol. 47 ›› Issue (4): 519-521.doi: 10.12183/j.scjpm.2021.0519

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实时荧光定量PCR法在低密度疟原虫感染病例中的应用研究

黄宗杰, 罗乐, 吴衍恒, 郭庆林, 欧慧, 高赛珍   

  1. 中山市疾病预防控制中心,广东 中山 528400
  • 收稿日期:2020-07-13 出版日期:2021-04-20 发布日期:2021-05-13
  • 作者简介:黄宗杰(1985—),男,大学本科,主管技师,主要研究寄生虫病与艾滋病相关检测
  • 基金资助:
    中山市卫生局立项项目(2018A020151)

  • Received:2020-07-13 Online:2021-04-20 Published:2021-05-13

摘要: 目的 运用实时荧光定量PCR法对低密度疟原虫患者血样进行基因检测,分析其检测效果。方法 选取恶性疟原虫患者和间日疟原虫患者抗凝全血标本各1份,制作厚血膜血片,计算其原虫密度。再以健康人“O”型抗凝全血为稀释液按照1∶4、1∶16、1∶64、1∶256、1∶1 024、1∶4 096、1∶16 384比例分别稀释,制作成7个浓度梯度血样。每个浓度血样分别制备1张厚血膜血片和提取1份疟原虫DNA,分别采用显微镜观察、实时荧光定量PCR法检测其疟原虫感染情况。结果 恶性疟原虫血片厚血膜显微镜法、实时荧光定量PCR法的检出区间分别为12.44~49.76个疟原虫/μL血、3.11~12.44个疟原虫/μL血;间日疟原虫血片厚血膜显微镜法、实时荧光定量PCR法的检出区间分别为45~180个疟原虫/μL血、2.81~11.25个疟原虫/μL血。结论 实时荧光定量PCR法对低密度疟原虫检出限明显高于显微镜检查,可有效解决目前低密度感染以及服用抗疟药后难检测、难鉴别疟原虫的问题,指导合理用药。

关键词: 疟原虫, 疟疾, 实时荧光定量PCR, 低密度

中图分类号: 

  • R115